血清脂蛋白的離心分離方法

時間：2015年12月22日信息來源：湘智離心機(jī) 字體：大中小【打印此頁】

血清脂蛋白的快速離心分離法

利用不同容量的角式轉(zhuǎn)頭及很容易配制的梯度液，在各種型號的超速離心機(jī)上都能得到滿意的分離結(jié)果。下面舉了幾個分離實例，實際上還可以應(yīng)用于各種型號各種容量的固定角式轉(zhuǎn)頭。

（一）梯度液 A液：11.40gNacl，0.1g EDTA-Na2，置于1000ml量筒中加入500ml重蒸水及1 ml 1N NaOH，混勻至全部溶解。加重蒸水至1000ml最后再加3ml重蒸水（Nacl：0.195mol）。終密度1.006g/cm³，PH10.37。 B液：加24.98g NaBr 到100ml A液中。終密度1.182g/cm³。（Nacl：0.195mol， NaBr：7.65mol），PH9.72。 C液：加78.32g NaBr 到100ml A液中。終密度1.478g/cm³。（Nacl：0.195mol， NaBr：7.65mol），PH8.86。 （二）離心機(jī)及轉(zhuǎn)頭 • 離心機(jī)：Hitachi CP-MX系列超速離心機(jī)或其他類似機(jī)組。 Hitachi CS-150GXL微量超速離心機(jī)。 • 轉(zhuǎn)頭，離心管；S 140 AT：140,000rpm,1,050,000×g，10×2ml，K=5，1PC厚壁管。 S 80 AT3：80,000rpm,415,000×g，8×8ml，K=23，6PC厚壁管。 S 70 AT：70,000rpm,505,000×g，8×40ml，K=44，40PA管。 （三）血漿-血球分離： 全血，角轉(zhuǎn)頭或甩平轉(zhuǎn)頭3000rpm×20min，沉淀為血細(xì)胞，上清血漿待用。 （四）乳糜粒分離 離心參數(shù)：各種轉(zhuǎn)頭均可用，4×10⁶（g×min），10℃ 梯度液：離心管下部3/4容積為血漿，上部1/4容積為0.15MNacl+0.3MEDTA。PH7.4。離心結(jié)果：乳糜粒上浮，離心管傾斜，吸管貼管壁慢吸出（約占血漿容積的2~6%。禁令12小時以上供血者血漿中乳糜含量很低，食后供血者含量較高。 （五）血清脂蛋白分離 VLDL分離（ρ<1.006g/cm³）

轉(zhuǎn)頭

離心管內(nèi)液體分布

離心參數(shù)

結(jié)果

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