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同樣為動態上樣,但出樣不一樣。為提高出樣區帶的分辨率,采用轉子轉速降為零的靜態出樣,區帶在轉子降速過程中,由垂直區帶變為水平區帶,該轉子的進、出樣孔分布在上、下。做上述同樣的第一組KBr區帶離心步驟如下:
1.把清洗干凈的轉子按操作說明書進行組裝并加入離心腔;
2.連接下、上的進、出樣管道;
3.設置離心機并啟動使轉子轉速到4000r/min的區帶轉速;
4.加入密度為1.04克每立方厘米的KBr梯度液充滿整個轉子腔;
5.加入密度為1208克每立方厘米的KBr梯度液2000mL;
6.加入密度為1.32克每立方厘米的樣品4000mL;
7.加密度為1.33克每立方厘米的KBr墊液100mL;
8.設定離心機轉速為25000r/min運行22h;
9.離心機運行22h后自動降速為4000r/min,用密度為1.33克每立方厘米的KBr溶液來置換需要的樣品,這時同樣要把出樣管連接至紫外監測儀,根據紫外監測儀對蛋白吸收的峰值來判斷需要收集的有效區帶樣品。
從轉子容量可以看出,超速離心機所配的轉子容量是P35ZT轉子容量的4倍多,更適合種類疫苗大規模的工業化生產。
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